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生物分析中蛋白質(zhì)、多肽及寡聚核苷酸樣品制備、除鹽耗材介紹

更新時間：2012-06-04      瀏覽次數(shù)：2111

 


 
LC-MS是蛋白質(zhì)表征的強有力工具。反向HPLC/UPLC液相分離和質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是zui常用的分離模式，這種分離模式也是蛋白質(zhì)除鹽的有效方法。生物制品及蛋白質(zhì)溶液經(jīng)常儲存在一定鹽離子濃度的緩沖溶液中，如PBS（磷酸鹽緩沖溶液）。這些鹽溶液，能和蛋白質(zhì)形成加和離子，使數(shù)據(jù)解析更加復(fù)雜，同時，這些鹽類也抑制了ESI-MS分析時的離子化效率。因此，質(zhì)譜分析之前，蛋白質(zhì)的非揮發(fā)性鹽類的去除是重要的一步。沃特世公司的MassPREPTM 在線脫鹽小柱（2.1X10 mm，Part  number186004032）為客戶提供了簡單易行，快速（小于5分鐘的液相梯度，如圖1），及重現(xiàn)性高的有效脫鹽方法[1]。并成功應(yīng)用于12KDa~150KDa分子量范圍的完整蛋白質(zhì)的脫鹽LC-MS分析（如圖2）展示了這種除鹽柱用在細胞色素 C（分子量約12KDa），牛血清白蛋白BSA（分子量約62KDa），和IgG（分子量約150KDa）的除鹽效果，而且柱容量可高達10微克[2,3,4]。
 

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